Os fungos são utilizados por muitos anos na produção de alimentos e medicamentos. Atualmente, vêm ganhando crescente destaque em processos de biorremediação, como a descoloração de efluentes têxteis, de compostos fenólicos e na assimilação de metais pesados. Estas aplicações se devem à capacidade dos fungos, especialmente os de podridão branca, em sintetizar enzimas capazes de degradar diversos materiais, possibilitando seu crescimento sobre resíduos agroindustriais e a formação de corpos de frutificação. Os fungos do gênero Pleurotus têm demonstrado ser produtores de xilanase, lacase, lignina peroxidase, manganês peroxidase, entre outras enzimas. A presença de detergentes, surfactantes não-iônicos como o Tween 80, no meio de cultivo tende a aumentar a viabilidade das reações entre estas enzimas e seus respectivos substratos, bem como provocar alterações na estrutura da membrana celular que poderiam levar ao aumento da permeabilidade destas enzimas para o meio de cultivo. Assim sendo, o objetivo deste trabalho foi avaliar a influência da adição de diferentes concentrações de Tween 80 (0, 2,5, 5,0, 7,5 e 10%, massa/volume) sobre a produção de lacase por Pleurotus sajor-caju. Como meio de cultivo utilizou-se a água proveniente da primeira etapa do cultivo de cogumelos em meio sólido, que envolve a umidificação do substrato (palha de folha de bananeira) por imersão em água e posterior drenagem da água excedente. A esta adicionou-se glicose (10 g L^-1) , tartarato de amônio dibásico (5,4 mM) e cuso4 (150 µM). Os experimentos foram realizados em frascos Erlenmeyer de 500 mL contendo 100 mL de meio de cultivo cada, inoculados com 2 discos de ágar de 12 mm de diâmetro contendo micélio fúngico e incubados a 30oc com agitação recíproca de 110 min^-1 por aproximadamente 15 dias. Amostras foram retiradas periodicamente para acompanhamento das concentrações de glicose, biomassa e lacase. Os experimentos foram realizados em triplicata. A concentração de Tween 80 que mais favoreceu a atividade de lacase foi 7,5%. Em comparação aos experimentos que não utilizaram Tween 80, o aumento da atividade de lacase foi de 50 vezes. Para os experimentos utilizando-se concentração de Tween 80 igual a 7,5% observou-se atividade máxima de lacase em 6 dias de cultivo (3.016,47 U L^-1). A concentração máxima de biomassa foi de aproximadamente 9 g L^-1 em 10 dias de cultivo.