Palha de bananeira e casca de banana, agro-resíduos abundantes na região de Joinville, podem ser utilizados como substrato para produzir cogumelos do gênero Pleurotus. Durante o processo de colonização fúngica do substrato e de frutificação do Pleurotus, ocorre liberação de compostos de carbono, pela ação de enzimas lignocelulolíticas, modificando a relação C:N e degradando o complexo lignocelulósico da palha. O composto residual gerado no cultivo de Pleurotus spp. torna-se, então, um substrato com uma composição, em termos de carbono e nitrogênio, muito próxima àquela exigida para o cultivo de Agaricus blazei, um fungo com alto valor comercial devido às suas comprovadas propriedades medicinais. Existem inúmeras formulações de compostos empregadas no cultivo de fungos. Contudo, deve-se estar atento tanto a composição inicial do substrato como a suplementação e tratamento antes da inoculação, pois estes fatores estão diretamente relacionados a composição do corpo frutífero e ao rendimento (R%) e à eficiência biológica (EB%) obtidos. Este trabalho teve como objetivo estudar a composição química de diferentes formulações de substrato residual de Pleurotus spp., em termos de pH, matéria orgânica, cinzas, nitrogênio total, relação C:N, hemicelulose, lignina e celulose e o rendimento e a eficiência biológica de Agaricus blazei cultivado em diferentes formulações deste substrato. Um planejamento fatorial (2³) foi utilizado para avaliar: a influência de compostos residuais do cultivo de Pleurotus (somente palha de bananeira ou palha de bananeira e casca de banana), do tratamento do composto residual (in natura ou secos a 90ºC por 24h) e da concentração da suplementação com farelo de arroz (5 ou 10%), nos parâmetros produtivos. Os melhores resultados em termos de R (38,8 ± 8,89 %) e EB (5,5 ± 1,26%) foram obtidos quando A. blazei foi cultivado em composto residual contendo palha de bananeira e casca de banana, secos a 90ºC, suplementados com 10% de farelo de arroz. As análises químicas mostraram que a adiçao de casca de banana à palha de bananeira propiciou valores de pH mais elevados (5,69 a 6,11) e, portanto, mais próximos do valor de pH para o cultivo de Agaricus blazei. Além disso, propiciou também maior conteúdo de matéria orgânica (81,7%), hemicelulose, lignina e celulose. Portanto, a adição da casca de banana à formulação usual (apenas palha de banana) é uma alternativa viável para a reciclagem deste resíduo agroindustrial no meio ambiente e para a produção sequencial de dois gêneros de cogumelos com alto valor comercial.