O Ocimum basilicum L. (manjericão) é utilizado popularmente contra inflamações e convulsões. Os objetivos deste trabalho foram preparar e caracterizar soluções extrativas hidroetanólicas 70% (SE), frações de partição e de coluna cromatográfica obtidas de O. basilicum e avaliar a bioatividade dessas preparações no modelo de Artemia salina. As SE (maceração de 8 dias; proporção droga:líquido extrator 1:20) foram caracterizadas por cromatografia em camada delgada (CCD - gel de sílica-200 μm), revelada sob luz visível, 254 e 360 nm, bem como após reação com anisaldeído sulfúrico 0,5%. A caracterização da FLEP (fração de coluna) foi realizada por cromatografia em camada delgada, utilizando-se um sistema cromatográfico em gradiente. A análise da FEP (fração éter de petróleo de partição) e da FLEP por cromatografia gasosa (CG) permitiu evidenciar a purificação da FLEP em relação à solução extrativa. As SE de flores e folhas foram caracterizadas pelo eluente Acetato de etila:Ácido fórmico:Ácido Acético:Água 50:11:11:7, enquanto a SE de caules apresentou melhor perfil cromatográfico com o eluente Butanol:Ácido Acético:Água 6:1:5. As SE de folhas e flores apresentaram diferenças entre seus perfis, apesar de caracterizadas com o mesmo eluente. A SE de flores apresentou maior letalidade sobre larvas de artemia (CL50=10,6 μg/mL), enquanto as SE de caules e folhas demonstraram poder letal relativamente semelhantes 26,6 e 35,4 μg/mL, respectivamente. Duas substâncias com tempos de retenção de 5,91 e 6,94 minutos representam 55% da concentração total de FLEP. O teor de flavonóides totais para a FEP foi de aproximadamente 10%, enquanto na FLEP estes metabólitos não foram detectados. Os espectros obtidos na identificação de carotenóides por espectrofotometria no ultravioleta/visível são característicos destas substâncias e evidenciam a presença de substâncias análogas ao a-caroteno ou luteína na FLEP. A característica de lipossolubilidade apresentada pela fração, os resultados no UV e os cromatogramas obtidos por CG sugerem que as duas substâncias majoritárias encontradas na FLEP sejam carotenóides. As diferenças químicas e biológicas observadas nas preparações são importantes e indispensáveis para direcionar a pesquisa do O. basilicum.